正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，随后身体发生奇特的变化。偶然机缘，他目睹了蜘蛛侠（克里斯·派恩 Chris Pine 配音）和犯罪头目金并（列维·施瑞博尔 Liev Schreiber 配音）的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙，蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久，来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克（杰克·约翰逊 Jake M. Johnson 配音）出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋，并帮助这个帕克返回自己的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。 他们合力与恶势力展开斗争……
演员：乔什·哈切森 伊丽莎白·莱尔 派珀·卢比奥 马修·里沃德 弗莱迪·卡特 斯基特·乌尔里奇 西奥多斯·克莱恩 特欧·布里奥尼斯 奥布里·布罗克韦尔 本特利·库珀 梅根·福克斯 凯伦·高夫 麦肯娜·格瑞丝 韦恩·奈特 特拉兹·拉肖恩 贾昆·门罗-亨德森 托比·尼克尔斯 马修·帕特里克 韩·索托 凯特琳·埃德林顿
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演员：黛丽丝·韦恩伯格 罗德里戈·桑托罗 米丽娅姆·索卡拉斯 阿达尼洛·雷斯 罗莎·马拉古埃塔 克拉丽莎·皮涅罗 迪马斯·门多萨 丹尼尔·费拉特 海托尔·洛里斯 拉斐尔·凯撒 伊莎贝拉·卡唐 丹尼埃拉·雷斯 迭戈·保尔 阿尔登诺·桑托斯 托尼·弗雷拉 卡罗尔·梅德罗斯 艾瑞斯玛·费尔南德斯·罗德里格兹 朱莉亚·卡哈尼 罗伯森·内 露亚娜·布兰道
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